Protocol for in vitro germination and micropropagation of Himatanthus Sucuuba (Spruce ex Müll. arg.) Woodson

Abstract

Himatanthus sucuuba es importante en la medicina popular y se utiliza ampliamente como agente antitumoral, antifúngico, vermífugo y antianémico. En este contexto, el objetivo de este estudio fue desarrollar un protocolo para la germinación in vitro y la micropropagación de H. sucuuba. Las semillas se sumergieron en una solución de Cabrio Top al 1.0% (v/v) durante una hora en un agitador magnético y luego en una solución diluida de NaOCl (hipoclorito de sodio) al 0.1% (v/v) durante 30 minutos bajo agitación, seguido de una inmersión en alcohol al 70% durante 1 minuto. Posteriormente, las semillas se enjuagaron cuatro veces con agua destilada estéril y se inocularon en medio MS suplementado con las auxinas AIA, ANA y AIB en concentraciones de 0.0; 1.0; 3.0 y 5.0 mg L⁻¹. El diseño experimental fue completamente al azar, utilizando 10 tratamientos con 3 repeticiones de 10 semillas (n = 30). Se observó que el medio MS suplementado con AIA (5.0 mg L⁻¹) dio como resultado un 80% de germinación y plántulas con 5.97 cm de altura y 4.2 segmentos nodales. Para estimular el enraizamiento, los segmentos nodales se cortaron e inocularon en medio MS suplementado con BAP (0.1 mg L⁻¹) y en interacción con las auxinas AIA, 2,4-D y ANA, en concentraciones de 0.0; 3.0; 5.0 y 8.0 mg L⁻¹, y se mantuvieron en una sala de crecimiento a 25 ± 2 °C, con un fotoperiodo de 16 h. La combinación BAP+AIA (0.1 + 8.0 mg L⁻¹) mostró los mejores resultados con un 100% de brotación, 40% de formación de callos y 30% de enraizamiento. En conclusión, la propagación in vitro es una técnica prometedora para producir plántulas de H. sucuba; sin embargo, son necesarios ajustes hormonales.